人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定

      目的  探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法.

      方法  通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺,在外分泌汗腺生长的同时,成纤维细胞也在生长;用质量分数为0.25%的胰酶和0.02%的乙二胺四乙酸(EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞;以Dulbecco改良的Eagle培养液(DMEM)为基础培养基,添加胎牛血清(体积分数10%)、青霉素(100 kU/L)和链霉素(100 mg/L),置37 ℃、体积分数为5%CO2、95%空气、饱和湿度条件下培养.倒置相差显微镜和苏木素-伊红染色,观察成纤维细胞形态,并对培养细胞行波形蛋白免疫组化及染色体鉴定.

      结果  分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖,波形蛋白免疫组化染色为阳性,染色体分析为46条.

      结论  该方法所获得的皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养,为在细胞水平上研究伤口愈合的机制提供了充足、可靠的靶细胞.

      引用格式   李海红，周岗，付小兵 ，等.人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定.中国危重病急救医学，2005，17（2）：89-91.

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